抗原抗體結(jié)合特性

體外診斷產(chǎn)品的質(zhì)量很大程度上是由上游的IVD原材料決定的。

體外診斷試劑原料如抗原、抗體、診斷酶、引物等，是體外診斷試劑產(chǎn)業(yè)上游最重要的戰(zhàn)略節(jié)點(diǎn)，其質(zhì)量是決定體外診斷試劑質(zhì)量的最重要因素。其中，好的抗體是能做出好的試劑的前提，高質(zhì)量抗體診斷原料在最適的試劑制備條件下能夠發(fā)揮出最佳性能。但是抗體在經(jīng)過修飾偶聯(lián)后形成最終的免疫檢測(cè)分析系統(tǒng)則需要經(jīng)過多種復(fù)雜工藝，其中任何一環(huán)的變化都會(huì)對(duì)最終的試劑性能產(chǎn)生影響。

而且，我國(guó)的體外診斷試劑原料目前還主要依賴進(jìn)口，從行業(yè)長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展角度出發(fā)，必須掌握抗原/抗體診斷原料的制備技術(shù)。近幾年，IVD原料廠家不斷增加，原料質(zhì)量也不斷提高，對(duì)于我國(guó)體外診斷行業(yè)的發(fā)展具有很大的推動(dòng)作用。

抗原抗體結(jié)合力

靜電引力
范德華力
氫鍵結(jié)合力
疏水作用力

抗原抗體反應(yīng)特性

1）特異性

指抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)的專一性。實(shí)質(zhì)上，抗原抗體的結(jié)合只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)。由于兩者的空間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)，決定了抗原抗體結(jié)合的高度特異性。例如C反應(yīng)蛋白（CRP）、降鈣素原（PCT），雖來源于同一物種，但C反應(yīng)蛋白其僅與抗C反應(yīng)蛋白（CRP）的抗體結(jié)合，而不與抗降鈣素原（PCT）的抗體反應(yīng)。正是抗原抗體反應(yīng)的特異性才使免疫測(cè)定能在非常復(fù)雜的蛋白質(zhì)化合物（例如血清）中測(cè)定某一特定的物質(zhì)，而不需先分離待檢物。

但是這種特異性也不是絕對(duì)的，也可能出現(xiàn)交叉反應(yīng)。交叉反應(yīng)是指兩種抗原分子表面存在有相同或相似的抗原表位時(shí)，同一種抗體結(jié)合的現(xiàn)象。例如：絨毛膜促性腺激素（HCG）和黃體生成激素（LH）。LH 和HCG均由α和β兩個(gè)亞單位組成，兩者發(fā)生交叉反應(yīng)的原因是因?yàn)閮烧叩摩羴唵挝皇峭惖模河胔CG免疫動(dòng)物所得的抗血清中含有抗α-HCG和抗β-HCG兩種抗體，抗α-HCG抗體將與LH發(fā)生交叉反應(yīng)。在臨床檢驗(yàn)中，作為早孕診斷的試劑中必須應(yīng)用只對(duì)HCG特異的抗β-HCG，以避免與其它激素的交叉反應(yīng)的發(fā)生。

2）可逆性

抗原抗體結(jié)合是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的過程，抗原抗體復(fù)合物的解離取決于抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親和力及反應(yīng)條件（如離子強(qiáng)度、pH等）?？赡嫘灾缚乖贵w結(jié)合后形成的復(fù)合物在一定條件下可發(fā)生解離，恢復(fù)抗原抗體的游離狀態(tài)?？乖贵w結(jié)合是分子表面的結(jié)合，猶如酶與底物的結(jié)合，是一種非共價(jià)鍵結(jié)合，結(jié)合雖穩(wěn)定但可逆。

3）比例性

抗原抗體反應(yīng)遵循一定的量比關(guān)系。當(dāng)抗原抗體比例合適時(shí)，即曲線的高峰部分稱為等價(jià)帶（zone of equivalence）。在等價(jià)帶前后分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶。如果抗原或抗體極度過剩，則無沉淀物形成，在免疫測(cè)定中稱為帶現(xiàn)象（zone phenomenon）?？贵w過量稱為前帶（prezone），抗原過量稱為后帶（postzone）。在用免疫學(xué)方法測(cè)定抗原時(shí)，應(yīng)使反應(yīng)系統(tǒng)中有足夠的抗體量，否則測(cè)得的量會(huì)小于實(shí)際含量，甚至出現(xiàn)假陰性。

抗原抗體診斷原料結(jié)合曲線

因此，抗原/抗體診斷原料的靈敏度、特異性、效價(jià)和親和力是決定試劑盒性能的關(guān)鍵因素，也是體外診斷試劑生產(chǎn)商對(duì)體外診斷試劑原料性能考核的重點(diǎn)參數(shù)。